分光光度計是一種用于測量物質在紫外、可見和近紅外光譜區(qū)域的吸收特性的分析儀器?。其基本工作原理基于物質對光的選擇性吸收,即不同物質對不同波長的光具有不同的吸收能力。當一束單色光通過含有吸收物質的溶液時,溶液對光的吸收程度與溶液的濃度和光程長度成正比?12。
分光光度計主要由光源、單色器、樣品池和檢測器四個部分組成。光源提供連續(xù)光譜的光,單色器將復合光分解為單色光,樣品池用于盛放待測溶液,檢測器則測量透過樣品后的光強度?13。
分光光度計的操作原理基于朗伯-比爾定律,即一束單色光通過含有吸收物質的溶液時,溶液對光的吸收程度與溶液的濃度和光程長度成正比。具體來說,當一束單色光通過液層厚度為b的有色溶液時,溶質吸收了光能,光的強度會減弱,減弱的光強與溶液的濃度和光程長度成正比關系?45。
在實際操作中,首先需要選擇合適的波長,因為不同物質在不同波長下的吸收特性不同。然后,將待測溶液放入樣品池中,啟動分光光度計進行測量。通過測定標準溶液和待測樣品溶液的吸光度,可以求出待測樣液的濃度。需要注意的是,測量時應控制吸光度在合適的范圍內,以減少誤差?45。